Objetivo: Demonstrar a influência da concentração de sal (NaCL) na solução sobre a integridade
das hemácias
Princípio:. Quando comparamos duas soluções e essas apresentam a mesma concentração de
soluto, dizemos que ela é isotônica. Quando uma apresenta maior quantidade de soluto, ela é
chamada de hipertônica. Por fim, temos a solução com menor quantidade de soluto, que é
chamada de hipotônica.
Material: 2 ml de sangue com anticoagulante; Solução saturada de NaCl a 10%; Soro fisiológico (
sol. NaCl 0,9%); água; tubos de ensaio; pipetas; suporte para tubos; centrífuga
Método:
1. Enumerar 3 tubos (A, B e C) colocando 3,5ml de água no tubo A; 3,5ml de soro fisiológico
no tubo B; e 3,5ml da solução saturada de NaCL no tubo C.
2. Adicionar 1 gota de sangue em todos os tubos (A, B e C), homogeneizar e deixar na bancada
por 5 a 10minutos. Agitar
3. Centrifugar todos os tubos a 1500 rpm por 5min, retirar delicadamente da centrífuga e
observar se o sobrenadante está transparente (sem hemólise), suavemente rosa (hemólise
parcial) ou vermelho (hemólise total);
4. Desprezar o sobrenadante e observar o sedimento (hemácias) em lâmina e lamínula, ao
microscópio na lente de 40X; anotar as formas das hemácias ( integras, entumecida ou
cremadas.
Interpretação: observação nos tubos
TUBOS MEIOS Sobrenadante Sedimento
água HIPOTÔNICO vermelho não contém
soro fisiológico ISOTÔNICO transparente contém
saturado de NaCl HIPERTÔNICO rosado contém
Sobrenadante: Transparente (sem hemólise), suavemente rosa (hemólise parcial) ou vermelho
(hemólise total);
Ao microscópio observa-se as hemácias da
seguinte forma: Hemácias integras no meio
isotônico; Hemácias entumecidas hipotônico;
Hemácias cremadas no meio hipertônico.
Comentários:
Solução Isotônica: Uma solução isotônica é uma solução na qual a mesma quantidade de soluto
e solução está disponível dentro da célula e fora da célula. A solução e a porcentagem de soluto
são as mesmas dentro da célula que na solução fora da célula. Portanto, usando os números acima,
uma célula colocada em uma solução de água com NaCl de 0,9% está em equilíbrio. Assim, a
célula permanece do mesmo tamanho. A solução é isotônica em relação à célula.
Solução Hipertônica: Uma solução hipertônica é uma solução que contém mais soluto do que a
célula que é colocada nele. Se uma célula com uma concentração de NaCl de 0,9% é colocada
numa solução de água com uma concentração de NaCl de 10%, a solução é dita ser hipertônica.
Hyper significa mais, o que significa que a solução em que a célula é colocada contém mais soluto
do que a solução dentro da célula. Quando a solução contém mais soluto, isso significa que contém
menos água. A solução fora da célula é 10% de NaCl, o que significa que é 90% de água. A solução
dentro da célula é 0,9% de NaCl, o que significa que é 99,1% de água. Lembre-se, a solução flui
de uma maior concentração de água para uma menor concentração de água. Isto é para diluir áreas
com maiores concentrações de soluto, de modo que o equilíbrio possa ser alcançado. Sendo que
a solução externa é de 90% de água, enquanto o interior contém 99,1% de água, a água flui do
interior da célula para a solução externa para diluir as áreas altas da concentração de soluto.
Portanto, a célula perde água e encolhe.
Novamente, quando fazemos referência a uma solução para dizer que é hipertônico ou hipotônico,
estamos referenciando a quantidade de soluto presente na solução em comparação com o soluto
dentro da célula que está na solução. Se a solução fora da célula tiver mais soluto do que a solução
dentro da célula, a solução é hipertônica. Se a solução dentro da célula tiver mais soluto do que a
solução fora da célula, a solução é hipotônica. Se a solução fora da célula contém o mesmo soluto
que a solução dentro da célula, a solução é isotônica.
Solução Hipotônica: Uma solução hipotônica é uma solução que contém menos soluto que a
célula que é colocada nele. Se uma célula com uma concentração de NaCl é colocada numa
solução de água destilada, que é água pura sem substâncias dissolvidas, a solução no exterior da
célula é 100% de água e 0% de NaCl. Dentro da célula, a solução é 99,1% de água e 0,9% de
NaCL. A água, novamente, passa de uma concentração mais alta para uma concentração mais
baixa para dissolver a concentração de soluto para alcançar o equilíbrio. Assim, a água vai da
solução de água destilada para o interior da célula para diluir a concentração de soluto dentro da
célula. Como consequência, a célula inunda e, possivelmente, explode. Assim, colocar uma célula
com soluto em uma solução de água destilada causará inchaço e possível estouramento da célula